Von der Proteinreinigung bis zu analytischen Anwendungen mit Strep-Tactin®XT
Strep-Tactin®XT ist die hochaffine Variante für die Reinigung von Strep-getaggten Fusionsproteinen. Es bietet Bindungsaffinitäten im picomolaren Bereich für den Twin-Strep-tag®, wobei die Bindungsreversibilität und die milde Elution der immobilisierten Proteine erhalten bleiben. Strep-Tactin®XT eignet sich für eine effiziente Proteinreinigung unabhängig von der Proteinklasse und -größe, einschließlich anspruchsvoller und niedrig-exprimierter Proteine.
Protein purification
Fused to magnetic beads, MagStrep® Strep-Tactin®XT beads are the ideal tool for complex identification via pull-downs and fast small-scale batch purification in reaction tubes or 96-well plates. In particular, Strep-Tactin®XT 4Flow® high capacity provides superior performance for the purification of strep-tagged proteins from diluted cell extracts and allows for intensive wash procedures with large volumes of wash buffer. Strep-Tactin®XT 4Flow® high capacity resin is stable over a wide range of pH and compatible with various buffer conditions, and can be reused at least 100 times without losing performance. Due to this frequent reusability, experimental costs can be significantly reduced.
Binding capacity of CD56 antigen (82.6 kDa) and CD31 Fab fragment (50.3 kDa) fused to Twin-Strep-tag® during purification with Strep-Tactin®XT 4Flow® high capacity.
Analytical applications
The near covalent affinity of Strep-Tactin®XT to Twin-Strep-tag® expands the range of use towards analytical applications such as high throughput screening, assay development and protein kinetic studies. You can obtain Strep-Tactin®XT conjugated to microplates, fluorophores, or chips. Strep-Tactin®XT coated microplates ensure convenient diagnostic assay and high-throughput screenings with high stability and antibody-free protein immobilization. Moreover, immobilized biomolecules are presented to interaction partners in a uniform manner, which results in reliable and highly reproducible assay formats. The picomolar affinity is particularly valuable for surface plasmon resonance (SPR) analysis and bio-layer interferometry (BLI) and supports measurements with long dissociation times and slow off-rates. Moreover, Strep-Tactin®XT biosensors can be easily regenerated.
SPR chips were coated with Strep-Tactin®XT and used to immobilize a Twin-Strep-tagged CD45 nanobody. The results show that Strep-Tactin®XT stably binds the nanobody over a long period of time and is suitable for analyzing high-affinity interactions with slow dissociation rates.
Strep-Tactin®XT Reinigungszyklus
Proteinreinigung mit Strep-Tactin®XT ist sehr einfach und schnell, da der Reinigungszyklus für jedes Zielprotein (Strep-tag®II oder Twin-Strep-tag®) derselbe ist. Wenn jedoch ein Zielprotein eine spezifische Pufferzusammensetzung benötigt, z. B. PBS, HEPES oder keine Chelatoren wie EDTA, können die Puffer leicht angepasst werden, ohne dass der Reinigungszyklus geändert werden muss. Strep-Tactin®XT-Resin ist mit verschiedenen Pufferzusammensetzungen, Reagenzien und Additiven kompatibel. Eine Liste der kompatiblen Reagenzien für Strep-Tactin®XT finden Sie hier.
Strep-Tactin®XT |
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Bindungsaffinität |
Strep-tag® II: nM-Bereich Twin-Strep-tag®: pM-Bereich |
Elution |
Elution mit Buffer BXT (50 mM Biotin) |
Regenerierung |
Elution mit 100 mM NaOH oder 3 M MgCL2 |
