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Von der Proteinreinigung bis zu analytischen Anwendungen mit Strep-Tactin®XT

Strep-Tactin®XT ist die hochaffine Variante für die Reinigung von Strep-getaggten Fusionsproteinen. Es bietet Bindungsaffinitäten im picomolaren Bereich für den Twin-Strep-tag®, wobei die Bindungsreversibilität und die milde Elution der immobilisierten Proteine erhalten bleiben. Strep-Tactin®XT eignet sich für eine effiziente Proteinreinigung unabhängig von der Proteinklasse und -größe, einschließlich anspruchsvoller und gering vorhandener Proteine.

Reinigung von Proteinen

MagStrep® Strep-Tactin®XT, fusioniert mit magnetischen Beads, ist das ideale Werkzeug für die Identifizierung von Proteinkomplexen mittels Pull-Downs und die schnelle Batch-Reinigung in kleinen Formaten wie Reaktionsgefäßen oder 96-Well-Platten.

Insbesondere Strep-Tactin®XT 4Flow® high capacity erzielt hervorragende Ergebnisse bei der Reinigung von Strep-getaggten Proteinen aus verdünnten Zellextrakten und ermöglicht intensive Waschvorgänge mit großen Volumina an Waschpuffer. Strep-Tactin®XT 4Flow® high capacity Resin ist über einen weiten pH-Bereich stabil und mit verschiedenen Pufferbedingungen kompatibel und kann mindestens 100 Mal ohne Verlust an Bindekapazität wiederverwendet werden. Aufgrund dieser häufigen Wiederverwendbarkeit können die Kosten für Experimente erheblich gesenkt werden.

Analytische Anwendungen

Die nahezu kovalente Affinität von Strep-Tactin®XT zu Twin-Strep-tag® erweitert den Einsatzbereich auf analytische Anwendungen wie Hochdurchsatz-Screening, Assay-Entwicklung und kinetische Proteinstudien.

Sie können Strep-Tactin®XT konjugiert an Mikrotiterplatten, Fluorophore oder Chips erhalten. Mit Strep-Tactin®XT beschichtete Mikrotiterplatten ermöglichen komfortable diagnostische Assays und Hochdurchsatz-Screenings mit hoher Stabilität und antikörperfreier Proteinimmobilisierung. Darüber hinaus werden die immobilisierten Biomoleküle den Interaktionspartnern auf einheitliche Weise präsentiert, was zu zuverlässigen und hoch reproduzierbaren Assay-Formaten führt. Die picomolare Affinität ist besonders wertvoll für die Oberflächenplasmonenresonanzanalyse (SPR) und die Bio-Layer-Interferometrie (BLI) und unterstützt Messungen mit langen Dissoziationszeiten und langsamen Off-Raten. Außerdem können Strep-Tactin®XT-Biosensoren leicht regeneriert werden.

Hauptmerkmale der Proteinreinigung und -analyse mit Strep-Tactin®XT

  • Hochselektive Bindungseigenschaften, die zu einer unvergleichlichen Proteinreinheit führen (> 95 %)
  • Bioaktive Zielproteine durch schnelle einstufige Reinigung unter Target-spezifischen Bedingungen
  • Variabilität der Pufferbedingungen, z. B. hohe Salzkonzentrationen, Detergenzien, Metallionen, Chelatoren oder Reduktionsmittel
  • Günstig für Protein-Protein-Wechselwirkungsstudien aufgrund der milden Elutionsbedingungen, die die natürliche Proteinstruktur erhalten
  • Produkte für den gesamten Arbeitsablauf von der Klonierung über die Reinigung bis hin zu analytischen Anwendungen (ELISA, FACS, SPR, Mikroskopie, Western Blot usw.)

Strep-Tactin®XT gewährleistet außerdem scharfe Elutionsprofile und erzielt eine hohe Konzentration des Zielproteins. Strep-Tactin®XT toleriert neben verschiedenen Detergenzien und Additiven auch einen weiten pH-Bereich und trägt so zur universellen Einsetzbarkeit des Systems bei.

Strep-Tactin®XT Reinigungszyklus

Proteinreinigung mit Strep-Tactin®XT ist sehr einfach und schnell, da der Reinigungszyklus für jedes Zielprotein (Strep-tag®II oder Twin-Strep-tag®) derselbe ist. Wenn jedoch ein Zielprotein eine spezifische Pufferzusammensetzung benötigt, z. B. PBS, HEPES oder keine Chelatoren wie EDTA, können die Puffer leicht angepasst werden, ohne dass der Reinigungszyklus geändert werden muss. Strep-Tactin®XT-Resin ist mit verschiedenen Pufferzusammensetzungen, Reagenzien und Additiven kompatibel. Eine Liste der kompatiblen Reagenzien für Strep-Tactin®XT finden Sie hier.

Strep-Tactin®XT protein purification cycle
 

Strep-Tactin®XT

Bindungsaffinität

Strep-tag® II: nM-Bereich
Twin-Strep-tag®: pM-Bereich

Elution

Elution mit Buffer BXT
(50 mM Biotin)

Regenerierung

Elution mit 100 mM NaOH oder 3 M MgCL2

Erfahren Sie mehr über die Strep-tag® Proteinreinigung

Hier haben wir Links zusammengestellt, um Ihnen die Suche nach weiteren Informationen über die Strep-tag®-Technologie zur Proteinreinigung zu erleichtern. In unserem Webshop finden Sie die Produkte für die Proteinreinigung, die Ihren Forschungsanforderungen entsprechen. Lesen Sie den umfassenden Vergleich der am häufigsten verwendeten Tag-Systeme, Strep-tag® vs. His-tag. Stöbern Sie in Anwendungsbeispielen und häufig gestellten Fragen zum Strep-tag® Reinigungssystem oder laden Sie Anwendungshinweise in unserem Downloadbereich herunter.