Klonierung & Expression
Das StarGate-System ist ein vielseitiges System für die Klonierung im Hochdurchsatz und vereinfacht den Prozess mit rekombinationsbasierten Techniken für die schnelle Konstruktion einer Vielzahl verschiedener Expressionsvektoren.
Die direkte Transferklonierung ermöglicht den direkten Transfer von DNA-Fragmenten in einen Expressionsvektor Ihrer Wahl, während die zweistufige Klonierung die DNA-Sequenzen nacheinander zusammenfügt. Im ersten Schritt in einen sogenannten Eingangsvektor und von dort aus kann die GOI-Sequenz parallel in eine Vielzahl von Expressionsvektoren verteilt werden.
StarGate Cloning zeichnet sich durch eine hohe Rekombinationseffizienz aus und ist damit ideal für die Hochdurchsatzklonierung, um die besten Expressionsbedingungen für ein Protein zu validieren. Expressionsvektoren sind für die Proteinproduktion von entscheidender Bedeutung, da sie eine hohe Expression mit regulatorischen Elementen für eine effektive Kontrolle gewährleisten sollen.
Die Expression in E. coli ist aufgrund des schnellen Wachstums und der gut verstandenen Genetik sehr beliebt, obwohl die Codon-Optimierung und die Proteinfaltung berücksichtigt werden müssen. Das Tet-Expressionssystem ermöglicht eine strenge Kontrolle der Genexpression mit Tetracyclin, was regulierte Studien der Genfunktion ermöglicht. Restriktionsenzyme vom Typ IIS ermöglichen nahtlose DNA-Konstrukte, indem sie die DNA an bestimmten Stellen außerhalb der Erkennungssequenzen schneiden.
Die Auswahl geeigneter Expressionswirte, wie Bakterien, Hefe, Insekten- und Säugetierzellen, ist für eine erfolgreiche Proteinproduktion von entscheidender Bedeutung und bietet jeweils einzigartige Vorteile. Die Transfektion, also das Einbringen von Nukleinsäuren in Zellen, ist für die Untersuchung von Genfunktionen, die Produktion rekombinanter Proteine und die Entwicklung von Gentherapien unerlässlich. Der MEXi-Arbeitsablauf bietet durch ein koordiniertes System von Expressionsvektoren, Transfektion und MEXi-293E-Zellen eine hocheffiziente und skalierbare Proteinproduktion in Säugetierzellen.
Diese Klonierungs- und Expressionssysteme finden breite Anwendung in Forschung und Biotechnologie, einschließlich der Produktion therapeutischer Proteine, der Untersuchung von Genfunktionen und der Entwicklung genetisch veränderter Organismen für verschiedene industrielle Anwendungen. Auf unserer Website finden Sie weitere Informationen zu den einzelnen Themen.
